Read e-book online HPLC richtig optimiert: Ein Handbuch fur Praktiker PDF

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2,5 Å bei Methanol bzw. ca. 13 Å bei Acetonitril kann der hydrophobe Rest von polaren/ionischen Molekülen in Acetonitril „nur“ mit dem Ende der an der Oberfläche verankerten Alkylketten wechselwirken. Im Falle von Methanol im Eluenten können die Moleküle durch die wesentlich dünnere Lösungsmittel-Schicht hineindiffundieren und stärkere/zusätzliche Wechselwirkungen eingehen. Darüber hinaus könnte die Bildung von labilen Methanolaten polare Wechselwirkungen erleichtern, welche zu einer guten polaren Selektivität in Methanol führen.

Es gelingt uns, die Wechselwirkungen der uns interessierenden Komponenten mit der stationären Phase per se zu erhöhen, also „alles“ eluiert später (Möglichkeit 3a, Zunahme von k, z. B. Anteil von Wasser im Eluenten erhöhen). Oder es gelingt uns, die Wechselwirkung der Komponenten mit der stationären Phase individuell zu verändern, d. , eine Komponente reagiert auf diese Änderung mehr/stärker als die andere (Möglichkeit 3b, Zunahme von α, z. B. pH-Wert-Änderung bei polaren/ionischen Komponenten).

11 Isokratische Trennung von 5 Peaks an einer Nucleosil C18-Säule. Abb. 12 Trennung wie in Abb. 11 an einer CN-Säule. 1 Grundsätze der Optimierung in der HPLC am Beispiel der RP-Chromatographie Abb. 13 Trennung wie in Abb. 11 und 12 an einer CN- und C18-Säule, in Serie geschaltet. Als Resultat kann eine bessere Auflösung vor allem im vorderen Bereich des Chromatogramms festgestellt werden. Der letzte, apolare Peak wird durch das polare CN-Material nur unwesentlich festgehalten, die geringe Verlängerung der Analysenzeit kann in Kauf genommen werden.

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